Chemistry https://acikerisim.bingol.edu.tr/handle/20.500.12898/1364 2026-09-16T14:48:55Z 2026-09-16T14:48:55Z ERDOĞAN, Mehmet https://acikerisim.bingol.edu.tr/handle/20.500.12898/6336 2026-09-16T07:50:45Z 2018-01-01T00:00:00Z

Endemik Diplotaenia Bingolensis Bitkisinin Antioksidan Aktivitesinin Araştırılması ERDOĞAN, Mehmet ÖZET: Endemik D. bingolensis türünün toprak üstü kısımlarının önce inorganik sonra organik çözücü sistemleri ile reflüksü sonucu inorganik ve organik ham izolatları elde edildi. İnorgaik ham izolatın hekzan, diklormetan, etilasetat ve butanol ile ardışık fraksiyonlandırılması sonucu H2O-Hex, H2O-DCM, H2O-EtOAc ve H2O-But izolatları elde edildi. Organik ham izolatın hekzan, diklormetan, etilasetat, butanol ve su ile fraksiyonlandırılması neticesinde ise sırasıyla MeOH:DCM-Hex, MeOH:DCM-DCM, MeOH:DCM-EtOAc, MeOH:DCM-But ve MeOH:DCM-H2O izolatları elde edildi. Elde edilen her bir izolatın içermiş olduğu toplam fenolik madde ve flavonoit madde miktarları UV-VIS spektrofotometresi ile, apolar bileşenlerin analizi GC-MS spektrometresi ile, polar bileşenlerin kantitatif analiz ise HPLC-TOF/MS spektrofotometresi ile analiz edildi. Ayrıca her bir izolatın biyolojik aktivitesi DPPH radikali giderme aktivitesi, ABTS katyon radikali giderme aktivitesi, ferrik iyonları indirgeme kapasitesi ve ferröz iyonlarını şelatlama potansiyelleri gibi farklı antioksidan aktivite testleri ile mukayese edildi. H2O-DCM (137,08±2,08 μgKE/mgKİ) ve MeOH:DCM-EtOAc (127,08±5,21 μgKE/mgKİ) izolatının flavonoit içeriği açısından, H2O-DCM (665,83±47,62 μgGAE/mgKİ) ve MeOH:DCM-EtOAc (724,65±43,64 μgGAE/mgKİ) izolatlarının toplam fenol içeriği açısından en zengin izolatlar olduğu analiz edildi. MeOH:DCM-Hex ve MeOH:DCM-DCM izolatlarının linoleik asit (%16,95 ve 11,04) ve linolenik asit (%22,11 ve 18,45) içerdiği tespit eildi. Bütün izolatların rutin ve klorojenik asit açısından zengin olduğu belirlendi. En yüksek DPPH radiakali giderme aktivitesi 46,43±1,36 ve 47,58±10,03 μg/mL EC50 değerleri ile H2O-DCM ve MeOH:DCM-EtOAc izolatlarında görüldü.; ABSTRACT: Inorganic and organic crude isolates were obtained from the aerial parts of the endemic D. bingolensis species with refluxing first with inorganic, then with organic solvent systems. H2O-Hex, H2O-DCM, H2O-EtOAc and H2O-But isolates were obtained by successive fractionation of the inorganic crude isolate with hexane, dichloromethane, ethylacetate and butanol, respectively. Isolates of MeOH:DCM-Hex, MeOH:DCM-DCM, MeOH:DCM-EtOAc, MeOH:DCM-But and MeOH:DCM-H2O were obtained by fractionation of the organic crude isolate with hexane,dichloromethane, ethyl acetate, butanol and water, respectively. The total amount of phenol and flavonoids contained in each isolate was analyzed by UV-VIS spectrophotometry, analysis of lipophilic components by GC-MS spectrometry, and quantitative analysis of hydrophilic components by HPLC-TOF/MS spectrophotometer. Furthermore, the biological activity of each isolate was compared with different antoxidant activity tests such as DPPH radical scavenging activity, ABTS cation radical scavenging activity, ferric ion reduction capacity and chelating potentials of ferrous ions. (H2O-DCM (137.08±2.08 μgKE/mgKİ) and MeOH:DCM-EtOAc (127.08±5.21 μgKE/mgKİ) isolates in terms of flavonoid content, (H2O-DCM (665.83±47.62 μgGAE/mgKİ) and MeOH:DCM-EtOAc (724.65±43.64 μgGAE/mgKİ) isolates were the richest isolates in terms of total phenol content. MeOH:DCM-Hex and MeOH:DCM-DCM isolates contained linoleic acid (16.95% and 11.04) and linolenic acid (22.11% and 18.45). It was analyzed that the all isolates were rich in terms of rutin (1.231-47.231 μgHB/mgKI) and chlorogenic acid (0.121-12.122 μgHB/mgKI). H2O-DCM and MeOH:DCM-EtOAc isolates were showed the highest DPPH radical scavenging activity with 46.43±1.36 and 47.58±10.03 μg/mL EC50 values, respectively.

2018-01-01T00:00:00Z TAYSI, Mehmet Şerif https://acikerisim.bingol.edu.tr/handle/20.500.12898/6335 2026-09-16T07:37:33Z 2018-01-01T00:00:00Z

Glutatyon S-Transferaz (GST) Enziminin Japon Bıldırcın (Coturnix Coturnix Japonica) Karaciğerinden Saflaştırılması ve Karakterizasyonu TAYSI, Mehmet Şerif ÖZET: Bu çalışmada, glutatyon S-transferaz (GST; EC 2.5.1.18) enzimi bıldırcın karaciğerinden amonyum sülfat çöktürmesi ve glutatyon-agaroz afinite kromatografisi kullanılarak 15,86 EÜ/mg protein spesifik aktivite ile %12,36 verimle 46,1 kat saflaştırıldı. Enzim saflığını kontrol etmek ve alt birim molekül kütlelerini belirlemek amacıyla SDS-PAGE yapıldı ve tek bant elde edildi. Bıldırcın karaciğerinden saflaştırılan GST enziminin alt birim molekül kütlesi yaklaşık olarak 25,1 kDa belirlendi. Bıldırcın karaciğerinden saflaştırılan GST enzimi için yapılan karakterizasyon çalışmalarında; optimum pH, Tris-HCI tamponu pH=8,5, optimum iyonik şiddet, Tris-HCI tamponu 1,4 M, stabil pH, Tris-HCI tamponu pH = 8,5 ve optimum sıcaklık 55oC olarak bulundu. Saf enzime ait KM ve Vmax değerleri Lineweaver-Burk grafiklerinden faydalanılarak GSH substratı için KM, 0,114 mM, Vmax 0,672 EÜ/mL; CDNB substratı için KM, 0,048 mM, Vmax, 0,047 EÜ/ mL olarak hesaplandı.; ABSTRACT: In the present study, glutathione S-transferase enzyme (GST; EC 2.5.1.18) was purified from quail (Coturnix, coturnix japonica) liver with 15.86 EU/mg specific activity, in a yield of 12.36%, 46.1 purification fold, by ammonium sulfate precipitation and glutathione agarose affinity chromatography. SDS-PAGE was performed to control enzyme purity and to determine subunit molecular masses and single band was obtained. The subunit molecular mass of the GST enzyme purified from the quail liver was determined as approximately 25.1 kDa. Quail liver GST enzyme characterization studies carried out; optimum pH, Tris-HCl buffer pH = 8.5, optimum ionic strength, Tris-HCl buffer 1.4 M, stable pH, Tris-HCl buffer pH = 8.5 and optimum temperature was found as 55 oC. KM and Vmax values of pure enzyme were obtained from Lineweaver-Burk graphs. For the GSH substrate, KM 0.114 mM, Vmax 0.672 EU / mL, for CDNB substrate, KM 0.048 mM, Vmax 0.047 EU / mL was calculated respectively.

2018-01-01T00:00:00Z KHOSHNAW, Luqman Qader Ahmed https://acikerisim.bingol.edu.tr/handle/20.500.12898/6332 2026-09-15T12:26:21Z 2018-01-01T00:00:00Z

Purification, Characterization and The Effect of Some Drugs on Glutathione S-Transferase (GST) Enzyme From Rat Erythrocyte KHOSHNAW, Luqman Qader Ahmed ABSTRACT: In this study, glutathione S-transferase (GST; EC: 2.5.1.18) enzyme was purified from rat erythrocyte in a single step by glutathione agarose affinity chromatography. The enzyme was purified with 6.3 EU/mg protein specific activity, with 44% recovery and 115 purification fold. The purity of enzyme was detected by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and produced a single protein band with a calculated molecular weight of 25.2 kDa. The characterization studies showed that the optimum pH=8 in potasium phosphate buffer, optimum temperature is 50oC, optimum ionic strength is 0.2M in potasium phosphate and stable pH=8 in potasium phosphate buffer. Kinetic studies performed for calculating KM and Vmax for (GST) using both glutathione (GSH), and 1-chloro 2,4- dinitrobenzene (CDNB) as two subsrates, the obtained results are 1.22 mM and 1.21 EU/mL respectively for GSH 0.374 mM and 3.614 EU/mL respectively for (CDNB). Finally inhibition or activation effect of some drugs on the enzyme activity were studied in vitro. The results proved that buscopan and ampisid were two activators of the enzyme, gentamicin and clindamicin were two inhibitors (IC50 values were found as 1.69 and 6.9 mM respectively and Ki values were found as 1.70 and 2.36 mM respectively), and cefazoline has no effect on the enzyme activity.; ÖZET: Bu çalışmada glutatyon S-transferaz (GST; EC: 2.5.1.18) enzimi, sıçan eritrositlerinden glutatyon agaroz afinite kromatografisi ile tek basamakta 6,3 EU / mg protein spesifik aktivite ile %44 verimle 115 kat saflaştırıldı. Enzimin saflığı, sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) ile tespit edildi.Saf enzimin alt birimlerine ait molekül ağırlığı 25,2 kDa olarak hesaplandı. Sıçan eritrositlerinden saflaştırılan GST enzimi için yapılan karakterizasyon çalışmalarında; optimum pH potasyum fosfat tamponu pH=8, optimum iyonik şiddet potasyum fosfat tamponu 0,2M, optimum sıcaklık 50oC, stabil pH potasyum fosfat tamponu pH=8 olarak belirlendi. Yapılan kinetik çalışmalarsonucunda; GST enzimine ait iki substrat olan glutatyon (GSH) ve 1-kloro- 2, 4-dinitrobenzen (CDNB) için KM ve Vmax değeri sırasıyla GSH için 1,22 mM ve 1,21 EU / mL, CDNB için 0,374 mM ve 3,614 EU / mL olarak bulunmuştur. Son olarak, bazı ilaçların enzim aktivitesi üzerine olan etkileri in vitro olarak çalışıldı. Yapılan çalışmalar sonucunda buscopan ve ampisidin antibiyotiklerinin rat eritrositlerinden saflaştırılan GST enziminin aktivitesini artırdığı, gentamisin ve klindamisin’ antibyotiklerinin, enzim aktivitisini inhibe ettiği (IC50 değerleri sırasıyla 1,69 ve 6,9 mM olarak, Ki değerleri sırasıyla 1,70 ve 2,36 mM bulundu), sefazolin antibiyotiğinin ise enzim aktivitesi üzerinde bir etkisinin olmadığı tespit edildi.

2018-01-01T00:00:00Z TİMÜR, İrfan https://acikerisim.bingol.edu.tr/handle/20.500.12898/6324 2026-09-14T12:48:16Z 2018-01-01T00:00:00Z

Farklı Triazol Bileşiklerinin Bazı Biyolojik Etkilerinin Araştırılması TİMÜR, İrfan ÖZET: İlaç sektöründe kullanılan bileşiklerin yapısı, özellikle Triazol gibi beş üyeli heterosiklik halka yapılarını ihtiva etmektedir. Birçok farklı uygulama alanı olan Triazol bileşiklerinin sentezi ve biyolojik aktiviteleri sürekli olarak çalışılmaktadır. Bu çalışmada; triazol bileşiklerinin bazı biyolojik aktiviteleri araştırılarak, ilaç olabilme potansiyellerinin ortaya konulması planlandı. Bu amaçla farklı triazol türevlerinin in vitro antioksidan aktiviteleri; indirgeme-yükseltgeme potansiyelleri ve Saccharomyces cerevisiae hücrelerinde malondialdehit (MDA) miktarı üzerine etkisinin analizi gibi biyokimyasal yöntemlerle araştırıldı. Ayrıca söz konusu triazol türevleri, in vitro koşullarda HT 29 (insan kolon adenokarsinoma) hücre hattı gibi kanser hücreleri üzerinde denenerek antitümör özellikleri araştırıldı. Daha sonra sıçanlarda kolon kanseri modeli oluşturularak sentezlenen maddelerin in vivo antitümoral potansiyelleri araştırıldı. Hayvan deneyleri sonunda sıçanlardan alınan karaciğer ve kan numunelerinde bu bileşiklerin antioksidan Vitamin A, E ve MDA düzeylerine olan etkileri in vivo antioksidan özelliklerinin belirlenmesi amacı ile çalışıldı. Deneysel çalışmalar sonucunda kullanılan bileşiklerin Saccharomyces cerevisiae hücrelerindeki MDA düzeylerini etkilediği görüldü. M-9 kodlu triazol bileşiğimiz kontrole göre anlamlı şekilde MDA düzeyinde azalma oluştururken, Vitamin E, A düzeyinde herhangi bir etki göstermemiştir. Serum ve karaciğer dokusunda ise bileşik gruplarında Vitamin A, E düzeyleri azalırken, MDA düzeylerinde artış gözlenmiştir. İn vitro çalışmalarda, HT 29 hücreleri canlılığı üzerinde kontrol grubuna göre istatistiksel açıdan anlamlı olacak şekilde, kanserli hücrelerin çoğalmasını önlediği belirlendi. Antimikrobiyal aktivite denemelerinde kullanılan Enterococcus faecalis bakterisi ve bir fungal suş Candida albicans mikroorganizmaları üzerinde belirgin bir etkiye sahip olmadıkları belirlendi. İn vivo deneysel çalışmalarda cis-platin grubu ile kıyaslamalarda, M-8, M-9, M-10 kodlu bileşiklerin, deneklerin kolonlarında ki tümör oluşumunu azalttığı görülmüştür. Bileşiklerin in vitro ve in vivo şartlarda çeşitli biyolojik aktivitelere sahip olduğu söylenebilir.; ABSTRACT: The structure of the compounds used in the pharmaceutical industry includes five membered heterocyclic ring structures, in particularly Triazole. Synthesis and biological activities of triazole compounds, which have many different application fields, are studied continously. In this study; some biological activities of triazole compounds have been investigated and the potential for use as a drug has been planned. For this purpose, in vitro antioxidant activities of different triazole derivatives have been researched by the biochemical methods such as reduction-oxidation potentials, the analysis of the effect on the amount of malondialdehyde (MDA) in Saccharomyces cerevisiae cells. In addition, the triazole derivatives have been tested on cancer cells such as HT 29 (human colon adenocarcinoma) cell line in vitro conditions and their antitumor properties have been investigated. Later, the colon cancer model have been established in rats to investigate in vivo antitumoral potentials of the synthesized substances. At the end of animal experiments, the effects of these compounds on antioxidant Vitamin A, E and MDA levels in liver and blood samples taken from rats have been studied with the aim of determining the in vivo antioxidant properties. As a result of the experimental studies, it was observed that the compounds used affected MDA levels in Saccharomyces cerevisiae cells. While the M-9 coded triazole compound significantly reduced MDA levels compared to the control level, there was no effect on Vitamin E and A levels. Vitamin A and E levels decreased in the compound groups for serum and kidney tissue while MDA levels increased for the same tissues. In vitro studies showed that HT 29 cells inhibit the proliferation of cancerous cells, statistically significant as compared to the control group on viability. It was determined that Enterococcus faecalis bacteria used in the antimicrobial activity experiments and a fungal Candida albicans microorganisms had no significant effect on them. Compared with the cis-platinum group in in vivo experimental studies, compounds with the codes M-8, M-9, M-10 showed reduced tumour formation in the columns of tested subjects. Compounds can be said to have various biological activities in vitro and in vivo conditions.

2018-01-01T00:00:00Z